激光共聚焦顯微鏡對(duì)于樣品尺寸確實(shí)有一定的特殊要求,這些要求主要基于顯微鏡的工作原理、樣品臺(tái)的尺寸以及顯微鏡的分辨率等因素。以下是對(duì)激光共聚焦顯微鏡樣品尺寸要求的詳細(xì)歸納:
一、生物樣品尺寸要求
蓋玻片厚度:對(duì)于生物樣品,通常需要使用蓋玻片進(jìn)行封片。蓋玻片的厚度要求通常不超過(guò)0.17mm,以確保顯微鏡能夠準(zhǔn)確聚焦并獲取清晰的圖像。
樣品尺寸與形狀:
樣品需要能夠貼壁良好,不能懸浮起來(lái)。這要求樣品在載玻片上固定好后,其尺寸和形狀應(yīng)適合顯微鏡的觀(guān)察。
對(duì)于需要重構(gòu)的樣品,需要明確掃描區(qū)域的大小、位置和Z步進(jìn)。這些參數(shù)會(huì)影響測(cè)試時(shí)間,并且需要確保樣品尺寸在顯微鏡的可觀(guān)察范圍內(nèi)。
二、材料樣品尺寸要求
*大面積:對(duì)于材料樣品,其*大面積通常在1.11×1.8mm到5×5mm的范圍內(nèi)。這個(gè)范圍是基于顯微鏡的視野和分辨率來(lái)確定的,以確保能夠獲取到清晰的圖像。
樣品平整性:材料樣品B須平整,以確保顯微鏡能夠準(zhǔn)確聚焦并避免圖像失真。
三、其他特殊樣品尺寸要求
菌液/污泥/污水類(lèi)樣品:這類(lèi)樣品通常需要進(jìn)行離心處理,以獲得適當(dāng)大小的沉淀物進(jìn)行觀(guān)察。沉淀物的尺寸應(yīng)適合顯微鏡的觀(guān)察范圍。
生物膜樣品:對(duì)于塊體類(lèi)生物膜樣品,建議其長(zhǎng)寬高尺寸不超過(guò)1cm;對(duì)于薄膜類(lèi)樣品,直徑尺寸不超過(guò)2cm。同時(shí),樣品表面需要平整,并標(biāo)出拍攝面。
植物類(lèi)樣品:植物類(lèi)樣品可以進(jìn)行簡(jiǎn)單冰切及刀切處理。對(duì)于特殊類(lèi)樣品,如病理組織切片,可能需要按照特定的尺寸和要求進(jìn)行制備。
與細(xì)胞共培養(yǎng)的樣品:這類(lèi)樣品的尺寸要求取決于與細(xì)胞的作用方式和樣本處理方式。例如,對(duì)于塊體類(lèi)樣品,如果與細(xì)胞直接接觸,則至少需要一個(gè)/種細(xì)胞/時(shí)間點(diǎn);如果采用浸提方式處理,則需要根據(jù)浸提方式和檢測(cè)時(shí)間點(diǎn)來(lái)確定樣品量。
四、綜合要求
拍攝需求:在提供樣品時(shí),需要明確激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)、拍攝類(lèi)型(2D/3D)、拍攝倍數(shù)等要求,以便顯微鏡操作人員能夠正確設(shè)置參數(shù)并獲取滿(mǎn)意的圖像。
樣品重量與尺寸限制:對(duì)于固體類(lèi)直接拍攝樣品,建議其長(zhǎng)寬不超過(guò)20mm,厚度不超過(guò)10mm,重量不超過(guò)10g。同時(shí),需要標(biāo)出測(cè)試面以確保正確觀(guān)察。
綜上所述,激光共聚焦顯微鏡對(duì)于樣品尺寸有一定的特殊要求。這些要求基于顯微鏡的工作原理和性能參數(shù)來(lái)確定,以確保能夠獲取到清晰、準(zhǔn)確的顯微圖像。在準(zhǔn)備樣品時(shí),需要根據(jù)具體的顯微鏡型號(hào)和檢測(cè)需求來(lái)遵循這些要求。
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